Enkla steg för att göra natriumcitratbuffert

Lär dig hur man gör natriumcitratbuffert i sex enkla steg. Natriumcitrat eller trisodiumcitrat kan buffertlösningar i pH-intervallet ca 3 till 6. 2. Citronsyra kan också göra jobbet.

Natriumcitratbuffert används för RNA-isolering eftersom den minimerar bashydrolys av RNA-strängarna. Detta gör det ett viktigt steg i mRNA-rening under genomforskning eller för att studera transkription.

Citratbaserade buffertar kan också hjälpa detekteringen av antigener i fixerade vävnadspreparat eftersom de bryter tvärbindningarna som bildas mellan antigenerna och fixeringsmediet.

Gör en natriumcitratbuffert med pH 6 med hjälp av anvisningarna nedan. Anvisningarna är inte bara enkla utan även snabb att utföra. Det tar bara cirka 10 minuter att slutföra dessa steg.

Två alternativ för att göra bufferten

Det finns två sätt att göra om att göra en natriumcitratbuffert. Först bestämma om du har både citronsyra och konjugatbasen, natriumcitrat, att arbeta med. Om du bara har citronsyra är det inte ett problem. Du kan fortfarande göra bufferten.

Å andra sidan, om du har både syra och bas, skapa en stamlösning av vardera. Blanda 21 gram citronsyra i 1 liter destillerat vatten och 29. 4 gram natriumcitrat i 1 liter destillerat vatten.

Om du bara har citronsyra, blanda 2. 1 gram på knappt 1 liter destillerat vatten och fortsätt till nästa steg.

Blanda citronsyra och natriumcitratlösningar

Nu när du har skapat din stamlösning (om du hade både en syra och en bas) eller blandat din syra i destillerat vatten (om du inte gjorde det) kan du fokusera på dina lösningar.

Blanda 82 ml citronsyralösningen med 18 ml natriumcitratlösningen.

Gör sedan den totala volymen av blandningen upp till strax under 1 liter med destillerat vatten. Lämna tillräckligt med volymer för att tillsätta natriumhydroxid (NaOH) i nästa steg.

Justering av pH

Under omrörning av lösningen försiktigt med en magnetomrörare använd 1M natriumhydroxid för att justera blandningens pH till 6. Därefter görs slutvolymen av lösningen upp till 1 liter med destillerat vatten genom att använda en volymkolv.

Vad du behöver göra bufferten

Det kommer inte bara att ta dig mycket lång tid att göra natriumcitratbufferten, du behöver inte heller många material för det. Med citronsyra, 1M natriumhydroxid, destillerat vatten och en kalibrerad pH-sond kommer du att vara halvvägs där. Användning av natriumcitrat är valfritt.

Att göra bufferten kommer också att kräva en 1-liters graduerad cylinder, en 1-liters volymkolv och tre 1-liters mediekolv. Slutligen behöver du en magnetisk omrörarstång och en magnetomrörare.

Om du inte har alla dessa material, överväg att använda labbet på din skol- eller arbetsplats, så du behöver inte köpa dem själv. Du kan också enkelt köpa dessa material online eller besöka en specialaffärsbutik i ditt område.