Hur lyofilisering bevarar biologiskt material

Lyofilisering, även känd som frystorkning, är ett förfarande som används för att bevara biologiskt material genom att avlägsna vattnet från provet, vilket innebär att man först fryser provet och sedan torkar det under vakuum vid mycket låga temperaturer.

Varför lyofilisering används

Lyofilisering, eller frystorkning av bakteriekulturer, stabiliserar kulturerna för långvarig lagring samtidigt som man minimerar den skada som kan orsakas av strikt torkning av provet.

Många mikroorganismer överlever väl när de frystorkas och kan lätt rehydreras och odlas i odlingsmedium efter långvariga lagringsperioder.

Lyofilisering används också inom bioteknik och biomedicinska industrier för att bevara vacciner, blodprover, renade proteiner och annat biologiskt material.

Detta korta laboratorieförfarande kan användas med någon kommersiellt tillgänglig frystork för att bevara din kultursamling.

Lyofiliseringsprocessen

Lyofiliseringsprocessen är faktiskt en tillämpning av ett fysiskt fenomen som kallas sublimering: övergången av ett ämne från fast till ett gasformigt tillstånd utan att först passera genom vätskefasen. Under lyofilisering avlägsnas vattnet i det frusna provet som vattenånga, utan att först tina provet.

Vanliga misstag

Ett av de vanligaste misstagen när det gäller lyofilisering känner inte till ditt provs smältpunkt, vilket gör det svårt att välja rätt lyofiliseringsmedel.

Dina prov kan smälta under processen. Ett annat vanligt misstag är att tänka kallare är bättre när det frystorkar på en frystork för hylla. Vid primärtorkning bör du sätta hylltemperaturen till strax under provets eutektiska temperatur. Det bör finnas tillräckligt mycket värme för att uppmuntra provets molekyler att flytta - men förhindra smältning.

Ett tredje misstag använder fel utrustning för dina prover. Eftersom frystorkare används i en gruppinställning, bör du veta följande innan du köper en:

• Hur mycket fukt kommer att lyofiliseras
• Vad provet är (och eutektisk temperatur)
• Hur man använder rätt frystork

Om enheten inte används korrekt kan den förstöra alla proverna. Vilket leder oss till ett annat vanligt misstag: Håll inte vakuumpumpen kvar. Pumpen måste vara i utmärkt fungerande ordning för att frystorka till jobbet. Körning av pumpen med gasförkopplingen öppen 30 minuter före och efter frysningsprocessen ökar pumpens livslängd. Öppning av gasballasten avlägsnar föroreningar från pumpen för att förhindra skador på interna komponenter. Du bör kontrollera pumpoljan ofta för missfärgning och partiklar och byt ut oljan efter behov.Regelbundna oljebyte håller pumpen vid ett optimalt vakuum under frostprocessen.

Slutligen kan det vara ett stort misstag om du har fel frysningstorkningsutrustning för din lyofiliseringsprocess. Behöver du ett proppprov under ditt vakuum? Då krävs en stoppkammare. Frysar du torkning i kolvar? Var noga med att ha en torkkammare med portar.

Genom att undvika ovanstående misstag kan du bättre sköta din frystork och -pump, och få bättre prov när din frystorkning är klar.

_Referenser

_{Labconco News. "Topp 5 misstag gjorda i lyofiliseringsprocessen." // www. Labconco. com / nyheter / topp-5-lyofilisering-misstag}